血液系统疾病种类繁多，从常见的贫血到复杂的白血病、淋巴瘤，其诊断需要综合形态学、免疫学、遗传学和分子生物学等多维度信息。在众多检测手段中，流式细胞术凭借其高通量、多参数、高灵敏度的特点，成为血液病诊断的重要工具之一。

技术原理

流式细胞术通过激光激发荧光标记的抗体，对单个细胞的物理和化学特性进行快速定量分析。其核心流程可分为三步：

细胞标记：将患者样本中的细胞与荧光标记的特异性抗体共孵育。这些抗体针对细胞表面或内部的特定抗原（如CD3、CD19、CD34等），形成"抗原-抗体-荧光染料"复合物。

液流聚焦：在压力作用下，细胞悬液与鞘液形成同心层流，使细胞逐个通过激光检测区，避免细胞重叠导致的信号干扰。

信号采集与分析：激光激发荧光染料产生散射光和荧光信号。前向散射光（FSC）反映细胞大小，侧向散射光（SSC）反映细胞内部复杂度，而不同波长的荧光信号则对应特定抗原的表达水平。计算机系统将电信号转换为数字信号，生成多维数据矩阵。

临床应用

（一）白血病与淋巴瘤的免疫分型。传统形态学检查仅能描述细胞形态异常，而流式细胞术通过检测细胞表面分化抗原组合，可明确白血病/淋巴瘤的细胞来源及分化阶段。例如，急性白血病：通过CD45/SSC设门区分髓系与淋系原始细胞，结合CD34、HLA-DR、CD117等标记判断分化程度。淋巴瘤：利用CD5、CD10、CD23、κ/λ轻链等标记，可鉴别B细胞淋巴瘤（如慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤）与T细胞淋巴瘤（如血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤），并检测克隆性B细胞增殖。

（二）微小残留病（MRD）监测。化疗或移植后，残留的恶性细胞数量可能低于传统检测方法的灵敏度阈值。流式细胞术通过设计多色抗体组合（如8-10色方案），可检测低至10⁻⁴至10⁻⁶水平的异常细胞。例如，急性淋巴细胞白血病：采用CD45/CD19/CD34/CD10/CD38/CD58/CD123等标记，构建“白血病相关免疫表型”（LAIP），追踪治疗后的克隆演变。慢性髓性白血病：监测BCR-ABL1阳性细胞比例，评估靶向治疗（如酪氨酸激酶抑制剂）的疗效。

（三）阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）诊断。PNH是由于PIG-A基因突变导致糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚蛋白缺失的获得性克隆性疾病。流式细胞术通过检测红细胞和中性粒细胞表面GPI锚定蛋白（如CD55、CD59）的表达缺失，可确诊PNH并量化克隆大小，灵敏度远高于传统Ham试验。

（四）造血干细胞移植的全程监测。移植前：检测供者造血干细胞表面CD34、CD90、CD49f等标记，评估干细胞数量与活性。移植后：监测嵌合状态（供者细胞占比）及免疫重建情况（如T细胞亚群、NK细胞比例），预测移植物抗宿主病（GVHD）风险。

技术优势

（一）高通量与多参数分析。传统方法每次检测仅能获取1~2个参数，而现代流式细胞仪可同时分析20个以上参数。例如，在多发性骨髓瘤诊断中，通过检测CD38、CD138、CD56、CD19、CD45等标记，可区分正常浆细胞与异常克隆性浆细胞，并评估疾病分期。

（二）高灵敏度与特异性。荧光标记抗体的结合可放大信号，使流式细胞术能检测低至数百个拷贝的抗原分子。例如，在急性早幼粒细胞白血病（APL）中，流式细胞术可检测PML-RARA融合蛋白的表达，辅助分子生物学检测确认诊断。

（三）动态监测与预后评估。通过定期检测患者外周血或骨髓样本，流式细胞术可实时反映疾病进展。例如，慢性淋巴细胞白血病：CD38、ZAP-70等标记的表达水平与疾病侵袭性相关。霍奇金淋巴瘤：治疗前后CD30阳性肿瘤细胞比例的变化可预测复发风险。

流式细胞术以其独特的“细胞指纹识别”能力，已成为血液病诊疗中不可或缺的技术。从疾病诊断到疗效监测，从克隆追踪到免疫重建评估，它为临床医生提供了“看得见”的细胞水平证据，推动血液病治疗向精准化、个体化方向迈进。